1982年创刊| ISSN 1008-3847| CN 44-1202/S
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面向生产，而向基层，面向农村；
以普及为主，兼顾提高；
以实用为主，兼顾基础理论；
立足广东，流通全国，走向世界。
养禽与禽病防治 2024年第4期 - 7 -

实时荧光定量 TaqMan RT-PCR 检测鸭甲肝病毒 III 型方法的建立及初步应用

袁朝霞 ( 仲恺农业工程学院 , 广东 , 广州 510225 )
刘湘 ( 广州达农生物科技有限公司 , 广东 , 广州 510665 )
王友令 ( 广州达农生物科技有限公司 , 广东 , 广州 510665 )
中图分类号:S855.3 文献标志码:A 文章编号:1008-3847(2024)04-0007-07
摘要: 研究旨在建立一种检测鸭甲肝病毒 III 型的实时荧光定量 Taq Man RT-PCR 技术。以鸭甲肝病毒 III 型 ( DHAV-III-SD22 株 ) RNA 为模板，建立检测鸭甲肝病毒 III 型的实时荧光定量RT-PCR 方法。制备含有上述 DHAV-III 目的片段的 RNA 作为标准品，以 10 倍比稀释的 DHAVIII 标准品建立标准曲线，测定敏感性。同时采用 5 个稀释度的标准品验证该方法的批内和批间重复性，并与本实验室所保存的多种病毒进行特异性检测。结果 ：建立的实时荧光定量 TaqMan RT-PCR 方法仅在鸭甲肝病毒III型RNA样本中检出荧光信号。最低检出量为1.267×102 copies/µL，敏感性良好，是常规 PCR 的 100 倍 ；线性范围达 10 个数量级。该方法重复性良好，批内和批间的变异系数均在1% 以下。经试验证明该方法具有良好的特异性、敏感性和重复性，可用于临床样本中 DHAV- Ⅰ和DHAV- Ⅲ的鉴别诊断。
关键字: 鸭甲肝病毒 III 型 鸭病毒性肝炎 实时荧光定量 RT-PCR
责任编辑: 曹伟胜