1982年创刊
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ISSN 1008-3847
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CN 44-1202/S
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本期杂志
2025年4期
办刊方针
面向生产,而向基层,面向农村;
以普及为主,兼顾提高;
以实用为主,兼顾基础理论;
立足广东,流通全国,走向世界。
养禽与禽病防治
2024年第5期
- 9 -
实时荧光定量 TaqMan PCR 检测禽腺病毒 C4 型方法的建立及初步应用
袁朝霞
( 仲恺农业工程学院 , 广东 , 广州 510225 )
刘湘
( 广州达农生物科技有限公司 , 广东 , 广州 510665 )
王友令
( 广州达农生物科技有限公司 , 广东 , 广州 510665 )
中图分类号:S855.3
文献标志码:A
文章编号:1008-3847(2024)05-0009-06
摘要:
研究旨在建立一种检测禽腺病毒 C4 型的实时荧光定量 TaqMan PCR 技术。以禽腺病毒 C4 型(Fowl aviadenovirus 4 isolate SD1601/FAdV-4 株)DNA 为模板,建立检测禽腺病毒C4 型的实时荧光定量 PCR 方法。制备含有上述 FAdV-C4 目的片段的 DNA 作为标准品,以10 倍比稀释的 FAdV-C4 标准品建立标准曲线,测定敏感性。同时采用 5 个稀释度的标准品验证该方法的批内和批间重复性,并与本实验室所保存的多种病毒进行特异性检测。结果 :建立的实时荧光定量 TaqMan PCR 方法仅在 FAdV-C4 DNA 样本中检出荧光信号。最低检出量为4.738×102 copies/μL ,敏感性良好,是常规 PCR 的 100 倍 ;线性范围达 9 个数量级。该方法重复性良好,批内和批间的变异系数均在 0.9% 以下。以上结果表明,建立的 FAdV-C4 实时荧光定量 PCR 检测方法灵敏度高、特异性强和重复性好,有用于临床样品中禽腺病毒 C4 型的快速检测潜力,为诊断 FAdV-C4 提供分子生物学依据 , 以降低 FAdV-C4 对我国养禽业的影响。
关键字:
禽腺病毒 禽腺病毒 C4 型 实时荧光定量 PCR
责任编辑: 曹伟胜