1982年创刊| ISSN 1008-3847| CN 44-1202/S
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面向生产，而向基层，面向农村；
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以实用为主，兼顾基础理论；
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养禽与禽病防治 2025年4期 - 14 -

实时荧光定量 TaqMan RT-PCR 检测番鸭呼肠孤病毒方法的建立以及初步应用

王一帆 ( 山东农业大学动物科技学院 , 山东 , 泰安 271018 )
刘湘 ( 广州达农生物科技有限公司 , 广东 , 广州 510665 )
韦良孟等 ( 山东农业大学动物科技学院 , 山东 , 泰安 271018 )
中图分类号:S855.3 文献标志码:A 文章编号:1008-3847(2025)04-0014-06
摘要: 研究旨在建立一种适用于番鸭呼肠孤病毒检测的实时荧光定量 TaqMan RT-PCR 技术。以番鸭呼肠孤病毒（Muscovy duck reovirus strain 815-12 segment S4）RNA 为模板，建立检测番鸭呼肠孤病毒的实时荧光定量 RT-PCR 方法。制备含有上述 MDRV 目的片段的 RNA 作为标准品，以 10 倍比稀释的标准品建立标准曲线，测定敏感性。同时采用标准品检测该方法的批内和批间重复性，并与本实验室所保存的多种病毒进行特异性检测。结果 ：建立的实时荧光定量 TaqMan RT-PCR 方法能在番鸭呼肠孤病毒RNA 样本中检出荧光信号。最低检出量为 9.46×101 copies/μL，敏感性良好，是常规 RT-PCR 的 1000 倍；线性范围达 11 个数量级。该方法重复性良好，批内变异系数和批间变异系数均在 1% 以下。经试验证明该方法具有良好的特异性、敏感性和重复性，可用于 MDRV 的临床鉴别诊断以及流行病学调查，有效阻止 MDRV 在鸭群间的传播。
关键字: 番鸭呼肠孤病毒 实时荧光定量 RT-PCR TaqMan 探针
责任编辑: 孙敏华