1982年创刊| ISSN 1008-3847| CN 44-1202/S
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面向生产，而向基层，面向农村；
以普及为主，兼顾提高；
以实用为主，兼顾基础理论；
立足广东，流通全国，走向世界。
养禽与禽病防治 2025年7期 - 9 -

实时荧光定量 TaqMan RT-PCR 检测 C 型禽偏肺病毒方法的建立以及初步应用

刘湘 ( 广州达农生物科技有限公司 , 广东 , 广州 510665 )
王友令 ( 广州达农生物科技有限公司 , 广东 , 广州 510665 )
韦良孟 ( 山东农业大学动物医学院 , 山东 , 泰安 271000 )
中图分类号:S855.3 文献标志码:A 文章编号:1008-3847(2025)07-0009-06
摘要: 研究旨在建立一种用于检测 C 型禽偏肺病毒（avian metapneumovirus subtype C, aMPV-C）的实时荧光定量 TaqMan RT-PCR 方法。制备含有 aMPV-C 目的基因的标准质粒，与本实验室所保存的多种病毒进行特异性检测。以 10 倍比稀释的 aMPV-C 标准品建立标准曲线，测定敏感性。同时采用 5 个稀释度的标准品验证该方法的批内和批间重复性。结果 ：建立的实时荧光定量 TaqMan RT-PCR 方法仅在C 型禽偏肺病毒 RNA 样本中检测出荧光信号。最低检出量为 6.90×101 copies/μL ，敏感性良好，是常规RT-PCR 的 1 000 倍；线性范围达 11 个数量级。该方法重复性良好，批内和批间的变异系数均在 0.7% 以下。经临床样品检测证实该法可用于 aMPV-C 的临床鉴别诊断及流行病学调查，为该病的综合防控措施和制定公共卫生安全政策提供分子生物学参考依据。
关键字: C 型禽偏肺病毒 实时荧光定量 RT-PCR TaqMan 探针
责任编辑: 向斌