实时荧光定量 TaqMan PCR 检测鸭疫里默氏杆菌方法的建立以及初步应用
许芬芬
(
惠州华晟生物技术有限公司
, 广东 , 惠州 516800
)
刘湘
(
广州达农生物科技有限公司
, 广东 , 广州 510665
)
梁昭平
(
华南农业大学兽医学院
, 广东 , 广州 510642
)
吴晓薇
(
广州海关技术中心
, 广东 , 广州 510623
)
韦良孟
(
山东农业大学动物医学院
, 山东 , 泰安 271018
)
张旭
(
惠州华晟生物技术有限公司
, 广东 , 惠州 516800
)
曾小辉
(
广州达农生物科技有限公司
, 广东 , 广州 510665
)
蔡广娣
(
广州达农生物科技有限公司
, 广东 , 广州 510665
)
熊金光
(
广州达农生物科技有限公司
, 广东 , 广州 510665
)
中图分类号:S855.1
文献标志码:A
文章编号:1008-3847(2026)01-0012-06
# 共同第一作者：许芬芬（1984 年 -），女，兽医师，主要从事畜禽传染病工作，E-mail：xufenfen@huassw.com；刘湘 （2000
年 -），女，本科主要从事动物疫病诊断试剂开发研究，E-mail：17687729445@139.com。
* 通讯作者：许芬芬（1984 年 -），女，兽医师，主要从事畜禽传染病工作，E-mail：xufenfen@huassw.com。
摘要:
研究旨在建立一种用于检测鸭疫里默氏杆菌（Riemerella anatipestifer, RA）的实时荧光定量
TaqMan PCR 方法。制备含有 RA 目的基因的标准质粒，与本实验室所保存的多种病原进行特异性检测。
以 10 倍比稀释的 RA 标准品建立标准曲线，测定敏感性。同时采用 5 个稀释度的标准品验证该方法的批
内和批间重复性。结果 ：建立的实时荧光定量 TaqMan PCR 方法仅在鸭疫里默氏杆菌 DNA 样本中检测出
荧光信号。最低检出量为 6.06×102
copies/μL，敏感性良好，是普通 PCR 的 100 倍 ；线性范围达 10 个数
量级。该方法重复性良好，批内和批间的变异系数均在 0.8% 以下。经临床样品检测证实该法具有较高的
检出率以及准确性。综上，研究建立的 RA 实时荧光定量 PCR 方法可用于该菌的临床鉴别诊断以及流行
病学调查，为该病的综合防控措施和制定公共卫生安全政策提供分子生物学参考依据。
关键字:
鸭疫里默氏杆菌 实时荧光定量 PCR TaqMan 探针
参考文献
基金：国家现代农业产业技术体系项目（CARS-40）。
2026 年第 1 期
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责任编辑: 付新亮
