1982年创刊| ISSN 1008-3847| CN 44-1202/S
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本期杂志
办刊方针
面向生产，而向基层，面向农村；
以普及为主，兼顾提高；
以实用为主，兼顾基础理论；
立足广东，流通全国，走向世界。
养禽与禽病防治 2022年第8期 - 2 -

ALV-J/K双重荧光定量PCR检测方法的建立

郭妍妍 ( .华南农业大学兽医学院，人兽共患病防控制剂国家地方联合工程实验室，农业部兽用疫苗创 制重点实验室，广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室 , 广东省 , 广州 510642 )
董欣怡 ( .华南农业大学兽医学院，人兽共患病防控制剂国家地方联合工程实验室，农业部兽用疫苗创 制重点实验室，广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室 , 广东省 , 广州 510642 )
黄健意 ( 广西忻城 县畜牧站 , 广西省 , 忻城 546200 )
中图分类号:S855.3 文献标志码:A 文章编号:1008-3847（2022）08-0002-07
摘要: 为建立可同时检测临床上主要流行的 J、K 亚群禽白血病病毒（Avian leukosis virussubgroup J/K, ALV-J/K），选取 ALV-J（CHN06）pol 基因 3′端和 gp85 编码基因之间的保守区域及 ALV-K（GDFX0601）gp85 编码基因保守区域设计引物和 TaqMan 探针，经过优化反应条件，建立了可同时检测 ALV-J 和 ALV-K 的双重荧光定量 PCR 方法，并通过特异性实验、灵敏性实验和稳定性实验对该方法进行评估。结果显示，该方法仅能特异性扩增 ALV-J 和 ALV-K，与 A、 B、E 亚群 ALV 及其他常见禽类病毒等均无交叉反应；其最低检测限度为 3.16×101copies/μL，比普通 PCR 灵敏性高 100 倍；其批内与批间变异系数均小于 2％；将 101 份血浆样品接种 DF-1细胞，并分别通过 ALV-J/K 双重荧光定量 PCR、ALV p27 ELISA 和普通 PCR 检测，结果显示，3种检测方法的总阳性率分别为 17.8％（18/101）、10.9％（11/101）和 10.9％（11/101）。以上结果表明，该方法具有良好的特异性、灵敏性和稳定性，可为 ALV-J 和 ALV-K 的诊断提供技术支持。
关键字: ALV-J ALV-K 双重荧光定量 PCR
责任编辑: 付新亮