1982年创刊| ISSN 1008-3847| CN 44-1202/S
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面向生产，而向基层，面向农村；
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以实用为主，兼顾基础理论；
立足广东，流通全国，走向世界。
养禽与禽病防治 2022年第12期 - 4 -

H7亚型禽流感病毒微滴式逆转录数字PCR检测方法的建立

李小军 ( 广东东莞市动物疫病预防控制中心 , 广东省 , 东莞 523086 )
黄洁莹 ( 广东东莞市动物疫病预防控制中心 , 广东省 , 东莞 523086 )
李敏 ( 广东东莞市动物疫病预防控制中心 , 广东省 , 东莞 523086 )
中图分类号:S855.3 文献标志码:A 文章编号:1008-3847（2022）12-0014-06
摘要: 本文建立了一种 H7 亚型禽流感病毒微滴式逆转录数字 PCR 方法，为 H7 亚型禽流感病毒核酸的定量检测和临床低浓度样品的诊断提供一种检测技术。根据 H7 亚型禽流感病毒的 HA 基因，设计了 1 对特异性的引物和探针，建立了 H7 亚型禽流感病毒的微滴式逆转录数字PCR 方法，对该方法的特异性、敏感性和重复性进行了评价，并初步应用于临床样品的检测。结果为，该方法的最低检出限为 3 copies/μL；与 H1 亚型、H3 亚型、H6 亚型禽流感病毒、新城疫病毒、鸡马立克氏病病毒、鸡传染性贫血病毒和鸡传染性法氏囊病病毒无交叉反应；检测 12 次 200倍稀释的 H7N9 亚型禽流感病毒(Re-2 株)的核酸，变异系数为 3.38%；检测了 30 份临床样品，结果均为阴性。结果表明，该方法的敏感性高，特异性和重复性好，适用于 H7 亚型禽流感病毒的临床检测和标准物质的标定。
关键字: H7 亚型禽流感病毒 微滴式逆转录数字 PCR 病毒核酸
责任编辑: 曹伟胜