1982年创刊| ISSN 1008-3847| CN 44-1202/S
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面向生产，而向基层，面向农村；
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以实用为主，兼顾基础理论；
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养禽与禽病防治 2023年第9期 - 12 -

实时荧光定量 TaqMan RT-PCR 检测鸭新型呼肠孤病毒方法的建立及初步应用

刘湘 ( 广州达农生物科技有限公司 , 广东 , 广州 510665 )
曾小辉 ( 广州达农生物科技有限公司 , 广东 , 广州 510665 )
蔡广娣 ( 广州达农生物科技有限公司 , 广东 , 广州 510665 )
中图分类号:S855.3 文献标志码:A 文章编号:1008-3847(2023)09-0012-06
摘要: 研究旨在建立一种适用于鸭新型呼肠孤病毒检测的实时荧光定量TaqMan RT-PCR技术。以鸭新型呼肠孤病毒 (SDDZ 株 )RNA 为模板，建立检测鸭新型呼肠孤病毒的实时荧光定量 RT-PCR 方法。制备含有上述 NDRV 目的片段的 RNA 作为标准品，以 10 倍比稀释的标准品建立标准曲线，测定敏感性。同时采用标准品检测该方法的批内和批间重复性，并与本实验室所保存的多种病毒进行特异性检测。结果：建立的实时荧光定量 TaqMan RT-PCR 方法能在鸭新型呼肠孤病毒 (SDDZ 株 )RNA 样本中检出荧光信号。最低检出量为 1.77 copies/μL ；线性范围达 10 个数量级。该方法重复性良好，批内变异系数不足 1.1%；批间变异系数不足 1.7%。该方法具有良好的特异性、敏感性和重复性，经体外感染细胞培养物以及临床样品检测证实，该方法可实时反映病毒液中的病毒含量，可在获得样品后 3 h 以内得到检测结果，可用于临床样品中鸭新型呼肠孤病毒的快速检测。
关键字: 鸭新型呼肠孤病毒 实时荧光定量 PCR TaqMan 探针
责任编辑: 贾伟新