1982年创刊| ISSN 1008-3847| CN 44-1202/S
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本期杂志
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面向生产，而向基层，面向农村；
以普及为主，兼顾提高；
以实用为主，兼顾基础理论；
立足广东，流通全国，走向世界。
养禽与禽病防治 2023年第11期 - 5 -

实时荧光定量 TaqMan PCR 检测新型鸭细小病毒方法的建立及初步应用

董伟峰 ( 山东省莱州市文昌路畜牧兽医站 , 山东 , 烟台 264000 )
刘湘 ( 广州达农生物科技有限公司 , 广东 , 广 州 510665 )
王友令 ( 广州达农生物科技有限公司 , 广东 , 广州 510665 )
中图分类号:S855.3 文献标志码:A 文章编号:1008-3847(2023)11-0005-07
摘要: 本研究旨在建立一种检测新型鸭细小病毒的实时荧光定量 TaqMan PCR 技术。以新型鸭细小病毒 (NDPV-SDXT-22 株 )DNA 为模板，建立检测新型鸭细小病毒的实时荧光定量PCR 方法。制备含有上述 NDPV 目的片段的 DNA 为标准品，以 10 倍比稀释的 NDPV 标准品建立标准曲线，测定敏感性。同时采用 5 个浓度的标准品为模板验证该法的批内和批间重复性，并与本实验室所保存的多种病毒进行特异性检测。结果 ：建立的实时荧光定量 TaqMan PCR 方法仅在新型鸭细小病毒 DNA 样本中检出荧光信号。最低检出量 1.15 copies/μL，敏感性良好，是常规 PCR 的 100 倍 ；线性范围达 11 个数量级。该方法重复性良好，批内变异系数与批间变异系数均低于 0.8%。经试验证明该法具有良好的特异性、敏感性和重复性，样本需求量低，可为 NDPV 的临床检测提供有效的分子生物学诊断依据。
关键字: 新型鸭细小病毒 实时荧光定量 PCR TaqMan探针
责任编辑: 贾伟新