1982年创刊| ISSN 1008-3847| CN 44-1202/S
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本期杂志
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面向生产，而向基层，面向农村；
以普及为主，兼顾提高；
以实用为主，兼顾基础理论；
立足广东，流通全国，走向世界。
养禽与禽病防治 2023年第12期 - 12 -

实时荧光定量 TaqMan PCR 检测鸭圆环病毒 II 型方法的建立及初步应用

邵明辰 ( 山东省鲁南牧工商有限公司 , 山东 , 枣庄 277500 )
刘湘 ( 广州达农生物科技有限公司 , 广东 , 广州 510665 )
吴晓薇 ( 广州海关技术中心 , 广东 , 广州 510623 )
中图分类号:S855.3 文献标志码:A 文章编号:1008-3847(2023)12-0012-07
摘要: 本研究旨在建立一种适用检测于鸭圆环病毒Ⅱ型的实时荧光定量 TaqMan PCR 技术。以鸭圆环病毒Ⅱ型（DuCV-Ⅱ-SDWF-22 株）DNA 为模板，建立检测鸭圆环病毒Ⅱ型的实时荧光定量 PCR 方法。制备含有上述 DuCV- Ⅱ目的片段的 DNA 为标准品，以 10 倍比稀释的标准品建立标准曲线，测定敏感性。同时采用 5 个稀释度的标准品验证该方法的批内和批间重复性，并与本实验室所保存的多种病毒进行特异性检测。结果 ：建立的实时荧光定量TaqMan PCR 方法仅在鸭圆环病毒Ⅱ型 DNA 样本中检出荧光信号。最低检出量为 2.5×101 copies/μL；线性范围达 10 个数量级。该方法重复性良好，批内变异系数不足 0.4%；批间变异系数不足 1%。经临床样本检测并与常规 PCR 检测符合率高达 98.55%，以上结果表明，研究建立的 DuCV-Ⅱ实时荧光定量 PCR 检测方法灵敏度高，特异性强、重复性好，可用于临床样品中鸭圆环病毒Ⅱ型的快速检测，从而减少 DuCV- Ⅱ在鸭群间的传播，保护鸭群的免疫系统以降低其他病原菌继发感染的可能性，提高经济效益。
关键字: 鸭圆环病毒 实时荧光定量 PCR TaqMan探针
责任编辑: 陈礼斌