1982年创刊
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ISSN 1008-3847
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CN 44-1202/S
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本期杂志
2024年12期
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面向生产,而向基层,面向农村;
以普及为主,兼顾提高;
以实用为主,兼顾基础理论;
立足广东,流通全国,走向世界。
养禽与禽病防治
2023年第12期
- 12 -
实时荧光定量 TaqMan PCR 检测鸭圆环病毒 II 型方法的建立及初步应用
邵明辰
( 山东省鲁南牧工商有限公司 , 山东 , 枣庄 277500 )
刘湘
( 广州达农生物科技有限公司 , 广东 , 广州 510665 )
吴晓薇
( 广州海关技术中心 , 广东 , 广州 510623 )
中图分类号:S855.3
文献标志码:A
文章编号:1008-3847(2023)12-0012-07
摘要:
本研究旨在建立一种适用检测于鸭圆环病毒Ⅱ型的实时荧光定量 TaqMan PCR 技术。以鸭圆环病毒Ⅱ型(DuCV-Ⅱ-SDWF-22 株)DNA 为模板,建立检测鸭圆环病毒Ⅱ型的实时荧光定量 PCR 方法。制备含有上述 DuCV- Ⅱ目的片段的 DNA 为标准品,以 10 倍比稀释的标准品建立标准曲线,测定敏感性。同时采用 5 个稀释度的标准品验证该方法的批内和批间重复性,并与本实验室所保存的多种病毒进行特异性检测。结果 :建立的实时荧光定量TaqMan PCR 方法仅在鸭圆环病毒Ⅱ型 DNA 样本中检出荧光信号。最低检出量为 2.5×101 copies/μL;线性范围达 10 个数量级。该方法重复性良好,批内变异系数不足 0.4%;批间变异系数不足 1%。经临床样本检测并与常规 PCR 检测符合率高达 98.55%,以上结果表明,研究建立的 DuCV-Ⅱ实时荧光定量 PCR 检测方法灵敏度高,特异性强、重复性好,可用于临床样品中鸭圆环病毒Ⅱ型的快速检测,从而减少 DuCV- Ⅱ在鸭群间的传播,保护鸭群的免疫系统以降低其他病原菌继发感染的可能性,提高经济效益。
关键字:
鸭圆环病毒 实时荧光定量 PCR TaqMan探针
责任编辑: 陈礼斌