1982年创刊| ISSN 1008-3847| CN 44-1202/S
稿件系统登录
本期杂志
办刊方针
面向生产，而向基层，面向农村；
以普及为主，兼顾提高；
以实用为主，兼顾基础理论；
立足广东，流通全国，走向世界。
养禽与禽病防治 2024年第3期 - 19 -

鹅星状病毒实时荧光定量 TaqMan RT-PCR 检测方法的建立及初步应用

梁昭平 ( 华南农业大学兽医学院 , 广东 , 广州 510642 )
刘湘 ( 广州达农生物科技有限公司 , 广东 , 广州 510665 )
王友令 ( 广州达农生物科技有限公司 , 广东 , 广州 510665 )
中图分类号:S855.3 文献标志码:A 文章编号:1008-3847(2024)03-0019-06
摘要: 研究旨在建立 1 种检测鹅星状病毒（Goose astrovirus, GAstV）的实时荧光定量 TaqMan RT-PCR 检测方法。制备含有 GAstV 目的基因的标准质粒，以 10 倍比稀释的 GAstV标准品建立标准曲线，测定敏感性。同时采用 5 个稀释度的标准品验证该方法的批内和批间重复性，并与本实验室所保存的多种病毒进行特异性检测。结果 ：建立的实时荧光定量 TaqMan RT-PCR 方法仅在鹅星状病毒 RNA 样本中检出荧光信号。最低检出量为 7.51×102 copies/μL ，敏感性良好，是常规 RT-PCR 的 1 000 倍 ；线性范围达 9 个数量级。该方法重复性良好，批内和批间的变异系数均在 1.4% 以下。通过检测临床样本并结合常规 RT-PCR 的检出结果，计算二者的符合率高达 96.15%，证明该法准确性高，可用于临床、生产实际的检测。综上该方法具有良好的特异性、敏感性、重复性以及准确性，用于 GAstV 的临床诊断、流行病学调查，降低GAstV 给养鹅业带来的影响。
关键字: 鹅星状病毒 实时荧光定量 RT-PCR TaqMan 探针 痛风
责任编辑: 付新亮